人Elisa試劑盒檢測原理

人Elisa試劑盒應用定性?shī)A心免疫檢測技術(shù)，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段，分別來(lái)自于該毒株的開(kāi)放閱讀框2和開(kāi)放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗體，這些抗體就會(huì )與HEV的多肽抗原結合，并固定在上面，洗板除去其它非特異性抗體和樣品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根過(guò)氧化物酶)酶結合物，經(jīng)第二次孵育后，酶結合物就會(huì )與*次孵育結合上的HEVIgM抗體相結合，洗板除去未結合的酶結合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時(shí)會(huì )發(fā)生酶-底物反應，只有那些含有HEVIgM抗體和酶結合物所形成的復合物的孔才會(huì )發(fā)生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應，并在波長(cháng):450nm處測量O.D.值,按照人Elisa試劑盒的測試標準,O.D.值大于或等于Cut-Off值的樣品被認為是初試陽(yáng)性.